Rún Mear-Tástáil Sróine Adenovirus
video
Rún Mear-Tástáil Sróine Adenovirus

Rún Mear-Tástáil Sróine Adenovirus

SARS-CoV-2 Cuirtear trealamh Tástála Aigéad Núicléigh i bhfeidhm maidir le braite cáilíochtúil d’aigéad núicléasach COVID-19 i táithíní nasopharyngeal, táithíní oropharyngeal agus sputum. Soláthraíonn na torthaí tástála bunús diagnóis mhóilíneach d’ionfhabhtú nó d’othair amhrasta, agus níor cheart iad a úsáid mar an t-aon chritéar amháin le haghaidh diagnóis chliniciúil.

Cur síos

Úsáid Beartaithe:

SARS-CoV-2 Cuirtear trealamh Tástála Aigéad Núicléigh i bhfeidhm maidir le braite cáilíochtúil d’aigéad núicléasach COVID-19 i táithíní nasopharyngeal, táithíní oropharyngeal agus sputum. Soláthraíonn na torthaí tástála bunús diagnóis mhóilíneach d’ionfhabhtú nó d’othair amhrasta, agus níor cheart iad a úsáid mar an t-aon chritéar amháin le haghaidh diagnóis chliniciúil.


Ábhair:

Méadair

Sonraíochtaí

Dath lid

Comhdhéanamh

Meascán Frithghníomhaithe COVID{0}}

1165µL ×1 feadán

Donn

Maolán, dNTPs, Primers, Tóraithe.

COVID{0}}Enzyme Mix

85µL ×1 feadán

Gorm

Taq DNA polymerase, Droim ar ais Transcriptase, UDG

Rialú Dearfach

200 µL ×1 feadán

Buí

Pseudovirus de Spriocghéine agus IC

Rialú Diúltach

200 µL × 1 feadán

Gan dath

ddH2O


Nós Imeachta Tástála:

A. Ullmhúchán Samplach

Is é RNA asbhainte an t-ábhar tosaigh don trealamh Tástála Aigéad Núicléach SARS-CoV-2.

Tábhachtach: Ní mór gach nós imeachta eastósctha aigéid núicléigh a dhéanamh go comhuaineach le rialú Dearfach amháin (40 μL, caol le tuaslagáin salanda steiriúla/PBS go dtí an toirt inmhianaithe) agus rialú Diúltach amháin (40 μL, caolaithe le tuaslagáin salanda steiriúla/PBS go dtí an toirt inmhianaithe).

Moltar úsáid a bhaint as na feisteáin tráchtála eastósctha aigéid núicléacha seo a leanas: PureLinkTM Viral RNA/DNA Mini Kit (Invitrogen); Trealamh Mini RNA víreasach (QIAGEN); Trealamh TIANamp Hi-DNA/RNA (TIANGEN);


B. Socrú Measc Frithghníomh

1. Ba chóir gach imoibrí agus sampla a leá go hiomlán, a mheascadh go hiomlán agus a lártheifneoiriú go hachomair ag teocht an tseomra (thart ar raon 18 go 25 céim) sula n-úsáidfear é.

2. Ullmhaigh an toirt riachtanach den Mheascán Imoibrithe i bhfeadán microcentrifuge polapróipiléine de mhéid cuí.

3. Pípéad 25 µL den Mheascán Imoibrithe isteach i ngach tobar de phláta imoibrithe tobair optúil cuí nó d'fheadán imoibrithe optúil cuí.


C. Teimpléad breise

1. Cuir 5 μL de RNA asbhainte leis as Samplaí/Rialú dearfach/Rialú Diúltach. Is é 30 μL an toirt iomlán.

Socrú Imoibrithe

Meascán Frithghníomhaithe COVID{0}}

23.3µL

COVID{0}}Enzyme Mix

1.7 µL

Samplaí nó Rialuithe

5 µL

Imleabhar Iomlán

30µL

2. Measc na samplaí agus na rialtáin go críochnúil leis an Meascán Frithghníomhaithe trí phíobáil suas agus síos/Vortex.

3. Dún an 96-pláta imoibrithe tobair le cláir chuí nó le scannán optúil ghreamaitheach agus cuir na cláir chuí ar na feadáin imoibrithe.

4. Lártheifneoir an 96-pláta imoibrithe tobair i lártheifneoir le rótar pláta micritriter ar feadh 30 soicind ag thart ar 2500rpm.


D. An Ionstraim PCR Fíor-Ama a Ríomhchlárú

Le haghaidh faisnéis bhunúsach maidir le socrú agus ríomhchlárú na n-ionstraimí PCR fíor-ama éagsúla, féach le do thoil do lámhleabhar úsáideora na hionstraime faoi seach. Tá an measúnú ionstraime optamaithe do chóras PCR Fíor-Ama ABI7500. Déantar an rith PCR le coinníollacha rothaíochta mar a thuairiscítear sa tábla thíos.

Níl.

Céim

Teocht

Fad

Timthriallta

Bailiú sonraí

1

Frithghníomh trascríobh droim ar ais

50 céim

10 nóim

1

/

2

Réamh-dhínádúrú

95 céim

30 soic

1

/

3

Nádúrú

95 céim

10 soic

45

/

Annealing agus síneadh

58 céim

30 soic

Bailiúchán fluaraiseachta pointe deiridh

Sainmhínigh na brathadóirí fluaraiseachta

Sprioc

Ainm Brathadóir

Tuairisceoir

Ceobhrán

RNA ar leith COVID{0}}

Sprioc géine ORF1ab

FAM

Dada

Sprioc N géine

HEX/VIC

Dada

Sprioc E géine

ROX

Dada

Rialú Inmheánach

géine coimeádaí tí

Cy5

Dada

*Socraigh tagairt inmheánach fhluaraiseachta na hionstraime go "None", mar shampla: Le haghaidh ionstraimí sraith ABI socraigh "Tagairt Éighníomhach" go "Nada".


E. Anailís sonraí

Le do thoil socraigh na paraiméadair anailíse agus déan anailís ar na sonraí de réir threoracha oibriúcháin na n-ionstraimí ábhartha.

Tóg ABI 7500 mar shampla:

Ba cheart an Bunlíne a shocrú go dtí raon a scriosann an fhluaraiseacht chúlra a aimsítear i dtimthriallta luatha an aimplithe, ach nach ndéanann forluí ar an limistéar ina n-ardaíonn comharthaí aimpliúcháin os cionn an chúlra (Luach tosaigh: 3~10; Luach deiridh: {{2} }). Ba cheart go mbeadh an Tairseach Rothaíochta (Ct) ag bun na céime easpónantúla. Cliceáil "Anailís" chun toradh na hanailíse a fháil go huathoibríoch, agus léigh an toradh braite sa fhuinneog "Tuarascáil".


Clibeanna Te: adenovirus secretion tástála-nasal tapa, an tSín, soláthróirí, monaróirí, monarcha, mórchóir

Next2:Gan Fhaisnéis

B’fhéidir gur mhaith leat freisin

Málaí Siopadóireachta